濕熱滅菌的原理和方法

       1、原理

       濕熱滅菌的原理是使微生物的蛋白質(zhì)及核酸變形導(dǎo)致其死亡。這種變形首先是分子中的氫鍵分裂，當(dāng)氫鍵斷裂時(shí)，蛋白質(zhì)及核酸內(nèi)部結(jié)構(gòu)被破壞，進(jìn)而喪失了原有功能。蛋白質(zhì)及核酸的這種變形可以是可逆的，也可以是不可逆的。雖然無所謂動(dòng)能行結(jié)構(gòu)被破壞，若氫鍵破裂的數(shù)量未達(dá)到微生物死亡的臨界值，則其分子很可能恢復(fù)到它原有的形式，微生物就沒有被殺死。為有效地使蛋白質(zhì)變形，如采用高壓蒸汽滅菌時(shí)，就需要水蒸氣有足夠的溫度和持續(xù)時(shí)間，這對滅菌效果十分重要。高溫飽和水蒸氣可迅速使蛋白質(zhì)變形，在規(guī)定操作條件下，蛋白質(zhì)發(fā)生變形的過程即微生物死亡的過程，是可預(yù)見和重復(fù)的。

       2、方法

       影響濕熱滅菌的主要因素有：微生物的種類與數(shù)量、蒸汽的性質(zhì)、藥品性質(zhì)和滅菌時(shí)間等。

      （1）流通蒸氣滅菌法

       是指在常壓條件下，采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法，滅菌時(shí)間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌，但不能保證殺滅所有芽孢，是非可靠的滅菌方法。

      （2）間歇蒸汽滅菌法

       利用反復(fù)多次的流通蒸汽加熱，殺滅所有微生物，包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法，但要重復(fù)3次以上，每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過夜，目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫，可將溫度降至75℃～80℃，加熱延長為30～60分鐘，并增加次數(shù)。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。

      （3）高壓蒸汽滅菌法

       103.4千帕蒸汽壓溫度達(dá)121.3℃，維持15-20分鐘。

       濕熱滅菌法 濕熱法可在較低的溫度下達(dá)到與干熱法相同的滅菌效果，因?yàn)椋孩贊駸嶂械鞍孜�收水份，更易凝固變性；②水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能；③蒸汽有潛熱存在，每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能，可迅速提高物體的溫度。

       濕熱滅菌法一般采用121℃，滅菌20-30min，如果是產(chǎn)孢子的微生物則應(yīng)采用滅菌后適宜溫度下培養(yǎng)幾小時(shí)，再滅菌一次，以用于殺死剛剛萌發(fā)的孢子。

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