真菌毒素是真菌在適宜環(huán)境條件下產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，在農(nóng)作物、食品、飼料及中藥中污染較為普遍，目前已知的真菌毒素有400多種，常見的真菌毒素有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、展青霉素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、伏馬毒素等。真菌毒素是天然存在而非人為添加的，盡管污染量小，但危害性大。在適宜的環(huán)境因素（如溫度、濕度）條件下，食品可以直接感染真菌并被其產(chǎn)生的毒素污染，且這種污染可以發(fā)生在食品鏈的任何階段如生產(chǎn)、加工處理、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏過程等。據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）統(tǒng)計(jì)，全球每年有25%的食品會(huì)受到不同程度的真菌毒素污染。

 

真菌毒素的危害

 

大多數(shù)真菌毒素可抑制動(dòng)物體內(nèi)蛋白的合成，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響動(dòng)物體肝臟、腎臟等器官的正常運(yùn)作。人或動(dòng)物攝入被真菌毒素污染的農(nóng)、畜產(chǎn)品，或通過吸入及皮膚接觸真菌毒素可引發(fā)多種毒害作用，如致幻、催吐、皮炎、中樞神經(jīng)受損，甚至死亡；許多真菌毒素還可在體內(nèi)積累后產(chǎn)生致癌、致畸、致突變和免疫毒性，這些均對(duì)人和動(dòng)物的生命與健康造成重大威脅。

 

國內(nèi)限量及監(jiān)測

 

我國食品安全限量標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》（GB 2761-2017）中規(guī)定了6種真菌毒素在不同類別食品中的限量值。由于真菌毒素污染的普遍性和危害的嚴(yán)重性，每年的食品安全監(jiān)督抽檢均包含真菌毒素的檢測項(xiàng)目，2022年新版《國家食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則》中檢測的真菌毒素種類與GB 2761-2017一致，食品涉及糧食加工品、食用油、油脂及其制品、調(diào)味品、飲料、罐頭等17大類食品。小編列出了所測毒素的限量值、檢測方法及檢測儀器。

 

目前常用的檢測真菌毒素的方法有：薄層色譜法（TLC）、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、膠體金法、液相色譜法（HPLC）以及液質(zhì)聯(lián)用法（LC-MS/MS），其中LC 和LC-MS/MS最為常用。

 

在真菌毒素檢測方面，島津開展了大量的工作，推出了多重島津分析儀器真菌毒素檢測的解決方案。

 

01 液相色譜 黃曲霉毒素柱后化學(xué)衍生分析系統(tǒng)

 

該系統(tǒng)具有靈敏度高的熒光檢測器以及性能優(yōu)異的化學(xué)反應(yīng)器，溫控精密度高，確保反應(yīng)效率穩(wěn)定和良好的重現(xiàn)性；同時(shí)高效的軟件，可以提高工作效率。

 

應(yīng)用示例—中藥材蓮子中黃曲霉毒素的測定：結(jié)果見下圖，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程相關(guān)系數(shù)均>0.999，添加回收平均回收率在78.7~95.0%之間，RSD為0.71~1.44%，重現(xiàn)性試驗(yàn)化合物保留時(shí)間和峰面積RSD見下表，從結(jié)果可以看出，該系統(tǒng)完全滿足檢測的需求。

 

02 液相色譜 黃曲霉毒素柱后光衍生系統(tǒng)

 

島津柱后光衍生系統(tǒng)采用高品質(zhì)的紫外光源和電路元器件，光源壽命高達(dá)9000小時(shí)；且衍生系統(tǒng)延遲體積小，衍生效率高；無需化學(xué)衍生試劑和高溫反應(yīng)系統(tǒng)，操作簡單、安全。PR-1000光化學(xué)衍生器可使黃曲霉毒素B1和G1的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)4-6倍，滿足高靈敏度分析需求。

 

值得一提的是，無論是光衍生系統(tǒng)還是化學(xué)衍生系統(tǒng)，都可以基于島津不同系列的HPLC搭建，可以靈活選擇您的配置方案哦。

 

03 i-Series 液相色譜 真菌毒素分析方法包

 

使用內(nèi)置的二極管陣列檢測器及外置的熒光檢測器（RF-20AXs），方法包包含專用色譜柱、方法文件、必要組件及使用說明書等；

 

使用此方法包可在14 min以內(nèi)實(shí)現(xiàn)10種常見真菌毒素的高靈敏度檢測。無需衍生的情況下滿足各國標(biāo)準(zhǔn)的最低檢測要求。

 

04 LC-MS/MS法測定真菌毒素

 

島津LC-MS/MS生物毒素?cái)?shù)據(jù)庫包含了谷物、水果、水產(chǎn)品中常見的100余種生物毒素的化合物信息、MRM參數(shù)、分析方法及操作指南，幫助用戶快速建立分析各種毒素的方法。同時(shí)島津還提供多個(gè)LC-MS/MS法測定真菌毒素的應(yīng)用分享，客戶可在島津官網(wǎng)免費(fèi)下載。

 

應(yīng)用實(shí)例：島津參考標(biāo)準(zhǔn)NY/T 3803-2020飼料中37種霉菌毒素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，建立了37種毒素的LC-MS/MS檢測方法。該方法采用正負(fù)模式同時(shí)掃描的方法，一針進(jìn)樣可在16 min完成37種生物毒素的同時(shí)檢測；通過方法學(xué)考察此方法靈敏度高，分析時(shí)間短，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于飼料中多種霉菌毒素的定量檢測。

 

島津Q-TOF篩查真菌毒素

 

目前，高分辨質(zhì)譜法在非法物質(zhì)篩查，未知組分鑒定等多個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用越來越廣泛，如下面發(fā)布的農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告均采用了高分辨質(zhì)譜法對(duì)化合物進(jìn)行篩查和確認(rèn)。

 

√ 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第312號(hào) 飼料中風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)的篩查與確認(rèn)導(dǎo)則 液相色譜–高分辨質(zhì)譜法（LC–HRMS）。

 

√ 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第197號(hào)-9-2019 畜禽血液和尿液中150種獸藥及其它化合物鑒別和確認(rèn) 液相色譜-高分辨串聯(lián)質(zhì)譜法。

 

針對(duì)真菌毒素，島津建立了Q-TOF生物毒素?cái)?shù)據(jù)庫，包括GB 2761中毒素在內(nèi)的50余種真菌毒素的化合物信息及不同碰撞能（CE）下的300多張二級(jí)質(zhì)譜圖，可以對(duì)常見的真菌毒素進(jìn)行篩查和確認(rèn)。