簡(jiǎn)便、靈敏、高通量，是誰(shuí)賦予唾液酸分析這些詞匯？
多聚糖是由單糖組成的碳水化合物，根據(jù)組成和鍵合位置的不同可排列成多種不同的低聚糖結(jié)構(gòu)。N-糖或 O-糖非還原末端的唾液酸封端可在介導(dǎo)治療性糖蛋白的有效性中發(fā)揮非常重要的作用。根據(jù)分子和應(yīng)用的不同，末端唾液酸可能會(huì)降低清除率，降低抗體依賴性細(xì)胞毒性 (ADCC) 活性或具有抗炎作用。
在生物治療藥物中發(fā)現(xiàn)的兩種常見(jiàn)唾液酸是 N-乙酰神經(jīng)氨酸（NANA 或Neu5Ac）和 N-羥乙酰神經(jīng)氨酸（NGNA 或 Neu5Gc）。Neu5Ac 通常為主要形態(tài)，而 Neu5Gc 不能由人類合成，它存在于生物治療藥物中使其可能具有免疫原性。因此，對(duì)治療性糖蛋白中唾液酸的絕對(duì)含量以及不同唾液酸種類的含量的監(jiān)測(cè)都至關(guān)重要。
靈敏、高通量的唾液酸分析與定量方法？Get！
Agilent AdvanceBio 唾液酸分析與定量試劑盒（部件號(hào) GS24-SAP）為唾液酸的分析與定量提供了一種靈敏的高通量方法。通過(guò)酸水解從糖蛋白中釋放出唾液酸，然后用熒光團(tuán) 1,2-二氨基-4,5-亞甲基二氧基苯 (DMB) 對(duì)其進(jìn)行衍生化，從而可以通過(guò)具有熒光檢測(cè) (FLD) 和可選的質(zhì)譜 (MS) 檢測(cè)功能的反相 (RP) 液相色譜進(jìn)行分離。
檢測(cè)優(yōu)勢(shì)：
– 工作流程（包括溫育期）可在約 5 個(gè)小時(shí)內(nèi)完成
– 1–2000 pmol 的寬唾液酸檢測(cè)范圍
– 對(duì)唾液酸化水平較低的蛋白質(zhì)的檢測(cè)靈敏度可達(dá)皮摩爾級(jí)
規(guī)格：
96 孔板形式
試劑盒中包括預(yù)分配的 NANA 和 NGNA定量標(biāo)準(zhǔn)品
試劑盒中包括唾液酸定性分析參比組合
所需的設(shè)備和樣品前處理注意事項(xiàng)
AdvanceBio 唾液酸分析與定量試劑盒適用于多種不同的樣品類型，包括糖蛋白、糖肽、糖脂、聚唾液酸以及全細(xì)胞。
根據(jù)樣品類型和濃度的不同，可能需要對(duì)高度唾液酸化的樣品進(jìn)行稀釋，而對(duì)于唾液酸化水平較低的單克隆抗體等樣品則可能需要通過(guò)干燥和復(fù)溶于少量去離子水中對(duì)其進(jìn)行濃縮。按照推薦的使用方式，該試劑盒包含的試劑足夠用于生成 24 個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)。這足以將 6 個(gè)樣品各平行制備三份，或?qū)?9 個(gè)樣品各平行制備兩份，更多詳情請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)。本方法的動(dòng)態(tài)范圍為 1–2000 pmol 唾液酸/樣品孔。
用戶需要提供的設(shè)備包括能夠?yàn)樗璧臏赜襟E提供 50 °C 和 80 °C恒定溫度的熱循環(huán)儀或帶蓋加熱模塊。分析需要使用具有熒光檢測(cè)功能的分析型 HPLC 系統(tǒng)（HPLC 或 UHPLC），如需了解更多信息，請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)。
